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COLORATION MGG (MAY
GRÜNEWALD GIEMSA) |
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Matériel :
Lames étalées, cuves et colorants
Mode opératoire :
- Réaliser un frottis
sanguin puis le fixer
- Transférer pendant 5mn dans une cave à
coloration contenant du colorant de May-Grunwald, dilué avec une égale
quantité d'eau
- Transférer pendant 15mn (sans laver) dans une
cuve à coloration contenant du colorant de Giemsa dilué préparé
extemporanément (1 vol. De Giemsa + 9 vol. d'eau ).
- Rincer 2 à 3 fois dans l'eau jusqu'à ce que
la différenciation soit complète : les lames prendront une coloration
rose. Ceci demande de 4 à 12 mn pour le sang périphérique, moins dans le
cas d’étalements plus minces.
Réactifs :
May Grünwald :
- poudre de May Grünwald 5 g
- méthanol qsp 1000 ml
Tampon :
- Hydrogénophosphate de Na + 15 g
- Déhydrogénophosphate de k+ 5 g
- eau neutre = eau tamponnée = eau distillée
qsp 5000 ml
Giemsa (solution
mère à diluer) : pour plus de détails, se reporter à la coloration de Giemsa.
- Colorant de Giemsa en poudre 0,75 g
- Méthanol (CH3OH) 65 ml
- Glycérine 65 ml
Mélanger tous les ingrédients dans un flacon
contenant des billes de verre et agiter. Remuer 3 fois par jour, pendant 4 jours
consécutifs. Filtrer.
(Consulter la notice d'emploi du fabricant, pour le cas où il indiquerait une
dose différente).
Dans certains pays, surtout anglophones, la poudre de Giemsa est remplacée par
le colorant de Wright